Mục đích của nghiên cứu này là tối ưu hóa thành phần của môi trường nuôi cấy để thu được enzym tiêu sợi huyết từ Bacillus subtilis ML01 bằng Phương pháp bề mặt đáp ứng (RSM) với Thiết kế tổng hợp trung tâm (CCD). Thiết kế thử nghiệm Plackett - Burman được sử dụng để sàng lọc các yếu tố chính ảnh hưởng đến quá trình tổng hợp sinh học các enzyme tiêu sợi huyết trong số 10 yếu tố được chọn, bao gồm glucose, maltose, sucrose, pepton đậu nành, chiết xuất nấm men, K2HPO4, MgSO4, CaCl2, pH và mật độ vi khuẩn ban đầu. Theo kết quả, maltose, pepton đậu nành, K2HPO4 và mật độ vi khuẩn ban đầu được xác định là các yếu tố quan trọng (giá trị p < 0,05). Trên cơ sở đó, khi sử dụng phương pháp RSM -CCD, đã tìm được môi trường thích hợp cho quá trình sinh tổng hợp enzyme tiêu sợi huyết với các giá trị tối ưu được xác định là maltose 18,15 g/L, pepton đậu nành 9,59 g/L, K2HPO4 2,33 g/L và mật độ vi khuẩn là 2,6 x 106 tế bào/mL ở 37oC trong 48 giờ lên men, mang lại hoạt tính enzyme tiêu sợi huyết cao nhất là 25,56 FU/mL, cao hơn 2,9 lần so với môi trường được tối ưu trước (8,89 FU/mL). Do đó, ma trận Plackett - Burman kết hợp với RSM - CCD là một công cụ hữu ích để xác định các giá trị tối ưu của các yếu tố khác nhau ảnh hưởng đến
quá trình sinh tổng hợp enzyme tiêu sợi huyết.