ABstract

Edwardsiella ictaluri, the causative agent of disease showing white spots in the internal organs of striped catfish (Pangasianodon hypophthalmus), is responsible for most economic loss in the productivity. One of the most important reasons for ineffective treatment of the disease is due to diagnosis procedure that is slow, inaccurate and costly conventional bacterial culture. To overcome this matter, a polymerase chain reaction (PCR) technique using a primer pair EiFd-1 and EiRs to detect E. ictaluri in channel catfish (Panangala et al., 2007) was employed for detection of E. ictaluri bacteria in striped catfish (PCR products is 407 bp for E. ictaluri). The same PCR result was obtained either using template in form of DNA extracted from bacteria culture overnight in normal broth medium, DNA extracted from bacteria colonies dissolved in physiological saline water (0.85% NaCl). PCR protocol could perform an early and accurate diagnosis the causative agent. In addition, the time to diagnose using PCR is shoter than conventional bio-chemical method (1/4 time). The result of study has good value for the rapid, accurate and less expensive diagnosis of E. ictaluri in stiped catfish. It can also be a useful basis for prevention and treatment in catfish farming.

Keywords: Edwardsiella ictaluri, Pangasianodon hypophthalmus, PCR, diagnosis

Title: Detection of Edwardsiella ictaluri causing white spots in the internal organs of striped catfish Pangasianodon hypophthalmus by using polymerase chain reaction technique

TóM TắT

Bệnh mủ gan do vi khuẩn Edwardsiella ictaluri đã và đang gây thiệt hại nghiêm trọng đến năng suất và sản lượng cá tra nuôi ở đồng bằng sông Cửu Long. Một trong những nguyên nhân ảnh hưởng quan trọng đến hiệu quả điều trị là do xác định tác nhân gây bệnh chậm, thiếu chính xác và tốn kém. Để khắc phục tình trạng này, quy trình PCR sử dụng hai đoạn mồi EiFd-1 và EiRs phát hiện E. ictaluri trên cá nheo mỹ (theo Panangala et al., 2007) được thực hiện phát triển để chẩn đoán nhanh E. ictaluri gây bệnh mủ gan trên cá tra. Qui trình cho kết quả phát hiện sản phẩm PCR là 407 bp khi sử dụng mạch khuôn là DNA ly trích từ dịch treo vi khuẩn nuôi tăng sinh qua đêm trong môi trường nutrient broth hoặc DNA ly trích từ dịch treo vi khuẩn chuẩn bị bằng cách lấy trực tiếp khuẩn lạc cho vào dung dịch 0.85% NaCl. Kết quả cho thấy qui trình có thể được sử dụng để phát hiện sớm và chính xác tác nhân gây bệnh mủ gan ở cá tra. Thời gian chẩn đoán bằng phương pháp PCR được rút ngắn đi rất nhiều (1/4 lần) so với phương pháp sinh hóa. Qui trình có giá trị ứng dụng tốt trong việc xác định nhanh và chính xác tác nhân gây bệnh ở cá tra nhằm làm cơ sở cho việc đề xuất giải pháp hiệu quả trong phòng và trị bệnh mủ gan ở cá tra.

Từ khoá: Edwardsiella ictaluri, Pangasianodon hypophthalmus, PCR, diagnosis